La cloroquina 145

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Mejora la cloroquina Número de IL-10 células que producen y la expresión de B7-2 e ICAM-1 en PBMC cultivadas En Vitro - cómo citar Hugosson, E. Bj408. doi: 10.1046 Información / Autor j.1365-3083.2002.01051.x El Departamento de Inmunología de la Universidad de Estocolmo y el Departamento de Enfermedades Infecciosas, Hospital Karolinska, Instituto Karolinska, Estocolmo, Suecia Dr. E. Hugosson, Universidad de Estocolmo, Arrhenius para Laboratorios Natural Ciencias, Departamento de Inmunología, S-106 91 Estocolmo, Suecia. E-mail: ehugossonhotmail. com Publicación Historia Edición en línea: 25 APR 2002 Versión de registro en línea: 25 Apr 2002 (Recibido el 14 de agosto de de 2001. Aceptado en forma revisada el 15 noviembre de 2001) Artículo herramientas Resumen La cloroquina se prescribe como un tanto contra la malaria y una drogas anti-inflamatoria. Sin embargo, sus efectos inmunomoduladores permanecen en gran medida poco clara. Estudios anteriores han demostrado que la cloroquina inhibe la proliferación inducida por antígenos, lo que implica efectos inmunosupresores. En este estudio, se examinó si la inhibición de la proliferación refleja los cambios en las moléculas de la superficie que son importantes para la activación de células T y de si la cloroquina afecta el equilibrio entre las citoquinas pro - y anti-inflamatorias. La cloroquina elevado la expresión de la coestimuladoras y de adhesión moléculas B7-2 (CD86) e ICAM-1 (CD54) en células mononucleares periféricas (PBMC). También se observó un mayor porcentaje de células CD14, y dentro de esta población de células, un aumento en la expresión de ICAM-1 fue revelado por experimentos de doble tinción. Evaluación de las frecuencias de la interleucina (IL) -10 y el interferón (IFN) - la producción de células en vitro - en PBMCs cultivadas mostraron que la relación entre pro y citocinas antiinflamatorias cambió después de la exposición a la cloroquina, lo que favorece la respuesta inmune anti-inflamatorios . Este efecto fue principalmente debido al aumento de las frecuencias de las células IL-10-producir y se observó con o sin la presencia de estimular los antígenos o mitógenos. Nuestros resultados indican que la cloroquina afecta a la dirección de la estimulación de linfocitos hacia una respuesta anti-inflamatoria que afecta por las células presentadoras de antígeno (APC) y el equilibrio entre las citoquinas pro - y anti-inflamatorios, en lugar de la inhibición de la producción de citoquinas en general. Introducción La cloroquina sigue siendo el fármaco antipalúdico más comúnmente utilizado en el África tropical, a pesar de la amplia resistencia de los parásitos Plasmodium falciparum a la droga. Cloroquina tiene un efecto tóxico directo bien estudiado en parásitos de la malaria, mientras que sus efectos anti-inflamatorios, utilizados en el tratamiento de la enfermedad reumática 1, todavía no han sido claramente dilucidado. Además, está aún por definir la relevancia clínica de los efectos antiinflamatorios de la cloroquina en la infección por malaria. Los médicos que trabajan en zonas de resistencia a la cloroquina han observado que la respuesta clínica después del tratamiento con sulfadoxina-pirimetamina (Fansidar) puede mostrar eficacia anti-parásito completa, pero es menos eficiente en la derogación de los síntomas clínicos en comparación con cloroquina 2. Estas observaciones sugieren que la cloroquina puede tener efectos beneficiosos, que no sean antiparasitario. Los niveles elevados de citoquinas pro-inflamatorias son importantes en la patogénesis de la artritis reumatoide tanto 3 y malaria 4, 5. Especialmente, los altos niveles de factor de necrosis tumoral (TNF) -16. La cloroquina reduce también las respuestas proliferativas a antígenos y mitógenos, explica posiblemente por problemas de procesamiento del antígeno 17, 18 y la producción de IL-2 19. En contraste con estos efectos supresores, la cloroquina estimula otras funciones celulares como la generación de proteasa de células endoteliales y la migración celular 20. Aunque estos in vitro e in vivo sugieren un efecto preferentemente inhibidora de la cloroquina sobre el sistema inmunológico, el mecanismo (s) exacto por el que la cloroquina ejerce sus efectos anti-inflamatorios son todavía por determinar. Hoy en día está bien establecido que el equilibrio entre las células T productoras de citoquinas funcionalmente distintos del fenotipo CD4 o CD8, denota células T auxiliares o T de tipo 1 (Th1 / Tc1) citotóxicos y de tipo 2 (Th2 / Tc2), determina si un individuo va a sucumbir a la enfermedad o no 21. Estos tipos de células se distinguen por su capacidad para regular las respuestas pro-inflamatorias y anti-inflamatorios. En las respuestas pro-inflamatorias, IFN-27. El perfil de la producción de citoquinas de células T es, en parte, regulada a nivel de la moléculas coestimuladoras B7-1 y B7-2 28. A pesar de la importancia de los saldos entre Th1 / Tc1 y respuestas de las células Th2 / Tc2, la cuestión crítica de cómo se regula este equilibrio es en gran parte sin resolver. Las diferencias en el procesamiento y presentación de antígenos, los tipos de células presentadoras de antígeno (APCs), así como citocinas producidas en una fase temprana de la respuesta inmune es probable que sean importantes. Otros factores implicados en este reglamento son el tipo y la dosis de antígeno, así como los factores genéticos del huésped 21. En este estudio hemos querido dilucidar si la cloroquina ejerce sus efectos sobre los factores clave que regulan el equilibrio entre las respuestas inmunitarias pro-inflamatorias y anti-inflamatorios. Materiales y Métodos Reactivos El fosfato de cloroquina fue proporcionado amablemente por por, Suecia), CD54-PE (Serotec, Oxford, Reino Unido) y CD45-FITC / CD14-PE (Becton Dickinson). Preparación y fraccionamiento de las células mononucleares de sangre periférica venosa de los adultos suecos sanos se elaboró ​​en tubos vacutainer heparinizados (Becton Dickinson, Meyland, Francia). células mononucleares periféricas (PBMC) se aislaron por Ficoll-Pacque (Amersham, Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Suecia) centrifugación en gradiente. PBMC se lavaron, se contaron en azul de tripano y se suspendieron en medio de cultivo tisular (TCM RPMI-Hepes Gibco, Paisley, UK) suplementado con gentamicina (25 tunaholm, Suecia) como se describe en otra parte 29. Todos los cultivos celulares se realizaron en TCM y se incubaron en una atmósfera húmeda que contiene 5 CO 2. suspensiones Ensayo de proliferación de células que consta de 10 monocitos y 90 células T (anteriormente demostrado ser las concentraciones óptimas para el antígeno y mitógeno ESPECÍFICOS la activación de células T 30) se sembraron por triplicado en placas de 96 pocillos de microtitulación de fondo plano (Nunclon) en 200 000 células / pocillo. La cloroquina a diversas concentraciones se añadió a los cultivos en el día 0, al igual que los anticuerpos anti-IL-10 en el experimento de bloqueo. El antígeno o mitógeno apropiado se complementó 16Ci / pocillo de 3H-timidina (Amersham, Solna, Suecia) a día 3, se incubaron durante 16 h más y se recogieron (Tomtec, Wallach, Sollentuna, Suecia). La proliferación se determinó por la incorporación de 3H-timidina, tal como se detecta por centelleo líquido (Microbeta, Wallac) y se define como la media de triplicados cpm. Los valores de CE50 se determinaron mediante la lectura de las concentraciones que correlacionan con la proliferación media-max en las curvas dosis-respuesta: Los ratios de la mediana entre la proliferación en los cultivos con o sin la adición de monocitos se calcularon de acuerdo con la siguiente fórmula: